实时荧光定量PCR总述

第一章：实时荧光定量 PCR 总述

一、实时荧光定量 PCR 的概念

实时荧光定量 PCR 即 Real-time PCR，利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程，最后通过C_T 值和标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

二、实时荧光定量 PCR 的原理

A 化学原理

变产物DNA分子为荧光信号，通过测定荧光值即可反映产物 DNA分子量。

B 数学原理

通过循环数“n"(C_T 值 ) 来计算起始 DNA 量。

三、实时荧光定量 PCR 方法的选择

四、实时荧光定量 PCR 的优势

比较不同样品间某基因的“量"的方法：

实时荧光定量PCR的优点：

(1)能够实时监测PCR反应的进程；

(2)具有更大的检测范围，能够对样本中的起始量进行准确定量；

(3)在单管中同时实现扩增和检测，无需PCR后处理。

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