转染HGF-1牙龈成纤维细胞, 质粒大小10646bp

1.可转染极度难转染的免疫细胞，悬浮细胞，如T细胞，NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;

2.可高效率转染sirRNA、小分子到任何哺乳动物细胞；

3.转染细胞后可10小时内快速代谢的第三代新转染试剂;

转染条件：

细胞密度：60左右

质粒DNA浓度：648ng/ul

质粒DNA大小：10646bp

培养板：6孔板

转染试剂用量：8ul

质粒DNA用量：电讯

转染试剂：AD600150，Advanced DNA RNA转染试剂

转染时间：48小时

血清：z7010-500 胎牛血清

细胞冻存：CE70100T无血清细胞冻存液

细胞活力检测：K009-500，cck8

重要指导方针：

-质粒DNA必须溶解在ddH 2 O中。如果溶解在Buffer中，转染效率会下降70%，甚至导致转染失败。

-质粒DNA必须去内毒素，否则转染效率会下降70%，甚至导致转染失败。

- 在制备转染复合物时，不能使用其他试剂稀释核酸或转染试剂。只需将核酸和转染试剂按照1:1的关系直接混合即可。否则，转染效率将下降80%，甚至导致转染失败。

-检查并与转染试剂混合后，用移液管吹吸10-15次以充分混合，确保管壁无液体残留。

- 将核酸与转染试剂混合并在室温下孵育至少 10-15 分钟。

- 将复合物加入细胞培养板并轻轻混匀，将板置于 CO 2 培养箱中继续培养。

- 在整个转染实验过程中，细胞可以在*培养基中培养，而不是使用无血清培养基。

- 如果转染后显微镜下观察到白色或黑色圆形颗粒，则为转染试剂的新材料颗粒。