WB电泳技巧分享

① 清洗玻璃板，去离子水冲，风干或烤干（一定要以处女座的精神去严格要求自己把板子洗干净，相当重要） 

② 按说明书配胶。先配下胶（分离胶），一般两块板配 10ml 的 10%的胶（20~80kDa 通用）胶的浓度根据你所需要跑的蛋白的分子量大小决定,混匀后灌胶，立即用正丁醇或无水乙醇封，待凝固后倒出正丁醇，用去离子水冲洗，滤纸吸干；③ 配上胶（积层胶），参考说明书，一般两块板配 4ml 的 5%的胶，混匀后灌胶，插板,待凝固。（可 4°过夜） 

④ 配电泳液（tris3.03g，甘氨酸 14.4g，SDS1g，定容至 1L） 

⑤ 将玻璃板装好放入电泳槽中，加电泳液，轻轻拔梳。 

⑥ 上样（这是每个WB达人最能装逼的一个环节，高手会告诉你凭感觉加样连孔都不用看） 

⑦ 连接电源，一定要注意红对红，黑对黑，定电压和时间，上胶（90v，约 40min，maker 分出条带），换压，下胶（120v，2h）。（不要让溴酚蓝跑出去）

经验总结：

想要条带跑的好看点，最好把上胶稍微配高一点。

换电压主要是看溴酚蓝有没有跑到下胶，没有确定的时间点。

胶最好现配现用，如果需要保存最好用湿润的保鲜膜包好。