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Western blot实验结果分析
发布时间: 2021-09-15 点击次数: 4406次Western blot实验结果分析
①微笑条带
解析:由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致,多出现于较厚的凝胶
处理办法:配胶时一定要充分混匀,待其充分凝固后再做后续试验
②带出现纹理现象
解析:样品不溶性颗粒
处理办法:加样前最好是离心一下样品
③电泳条带粗
(这是个内参 β-actin)
解析:蛋白样品没有浓缩,量太大
④条带出现好多洞洞
解析:转膜的时候没有把三明治里的气泡干掉
Western Blot是生物学上一种非常常用的实验方法,与之相似的还有Southern Blot和Northern Blot。但 WB 失败的情况也很多,有一些小技巧来尽量减少失败的概率。
“我的 WB 又没有杂出来,太桑心了"
“哇靠你的 WB 又没有杂出来,用掉多少抗体了,还买进口的!"
“哇靠你的 WB 又没有杂出来,却一直一轮又一轮的占用着蛋白电泳仪,我等到黄花都谢了!"
这些声音贯穿了很多人的整个研究生生涯,WB,虐你无数遍,然而凤凰涅盘然后浴火重生,从 WB 中参悟到了正确应对失败的人生道理。而在正确应对失败的同时,我们也要学会如何避免失败。