我的脂质体转染实验效率低，怎么办？

脂质体介导转染实验指的是，脂质包裹待转染DNA形成复合体，与细胞膜融合或内吞，进入细胞。然而，大量的脂质体-DNA复合体，只有一小部分能运送到细胞质并进入细胞核中。

如何提高脂质体介导转染效率的关键，就在这一步：提高复合体进入细胞质的效率。

1、避免使用阴离子试剂，使用新一代聚阳离子试剂，适用范围广，毒性相较以前的脂质试剂小。

2、使用阳离子脂质与DNA的*佳比例，以及一定数量细胞的阳离子脂质用量。可向购买试剂的公司进行询问。

这是因为过量的脂质容易受到培养皿中其他带电荷物质的干扰，如细胞外基质中的硫酸软骨素。

3、待转染的培养细胞应该从冻存库中重新培养。转染过程中，细胞在汇合状态不应超过24小时，单层细胞应处于对数中期。

4、转染过程中，培养基不建议加入抗生素。转染试剂使细胞通透性增加，进入细胞的抗生素浓度增加，会产生一定的细胞毒性。

5、某些血清蛋白可能会干扰脂质体-DNA复合体形成，因此应在无血清状态下形成复合体，后续过程可添加血清。

6、提高待转染基因的纯度，DNA的260nm：280nm应为1.8 。