实时荧光定量PCR的优化（二）

如果你所研究的靶序列有前人建立过实时荧光定量PCR的方法，就可以在公共数据库中查找，查看扩增效率、特异性、灵敏度等信息，省去从头开始的时间。

注意，使用前人建立的方法前，需要再次验证这个方法的参数是不是符合描述。防止长时间重复实验，却得不到想要的结果的人间惨剧。

推荐的公共引物探针数据库：

1、RTPrimerDB

这个数据库内的约6000个基因，来自人、拟南芥、大鼠等21个物种，相对其他数据库丰富。这些引物和探针，也是经过验证的，70%已发表。使用该数据库时建议通过网络代理登录。

2、PrimerBank 

这个数据库内的探针引物是通过算法设计得到的，主要包括人和小鼠的基因。数据库内的小鼠引物，经过广泛验证后，被证实有83%的成功率。

3、Real Time PCR Primer Sets 

这个数据库内的引物和探针都经过测试、优化，针对多种生物设计，包括人、小鼠、大鼠等的基因。