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补体介导法细胞毒实验
发布时间： 2021-11-01 点击次数： 1014次材料与仪器C57BL／6J小鼠
Hank’s液 单克隆抗体 补体 伊红-Y染液
眼科剪 眼科镊 平皿 不锈钢网 试管 吸量管 尖吸管 载玻片 盖玻片 显微镜实验步骤一、实验方法1. 小鼠胸腺细胞悬液的制备：将4～6周龄小鼠采用颈椎脱臼法处死，取出胸腺放入已加入约4 ml冷Hank’s液的平皿中，在100目的不锈钢网上研磨后，过筛，放入试管，离心1 000 rpm，5分钟，用Hank’s液洗两次。将沉淀的细胞重悬于Hank’s液中，配成1×107/ml细胞悬液。
2. 取试管3支，标明顺序，依据下表依次加入1×107/ml胸腺细胞悬液、抗小鼠Thy-1的单克隆抗体(最适稀释度)及Hank’s液，放入37℃水浴30分钟。3. 取出后每管加入1%伊红-Y染液1滴，混匀，室温放置2分钟。4. 重新混匀后分别在一张载玻片上滴片，加盖玻片镜检。先在低倍镜下观察，再用高倍镜观察，比较3管中细胞死活情况。二、实验结果死细胞呈红色，无光泽且肿胀变大；活细胞不着色、有光泽且形态正常。高倍镜下计数200个细胞并计算其中死细胞的百分数。计算公式如下：死细胞百分数= EQ EQ \F(实验管死细胞数%-对照管死细胞数%，100%-对照管死细胞数%)- 下一篇：补体介导的细胞毒试验
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