细胞培养常遇问题集锦（五）

细胞培养常遇见问题集锦第五期，小编继续与大家探讨细胞培养时遇到哪些让人烦恼的问题~

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问：请教一下大家，准备从别的实验室借一瓶细胞，20分钟之内可以拿到自己的实验室，运输的时候可以培养瓶里充满培养基，封口膜包紧，常温放在泡沫盒里吗？那拿到自己的实验室后，在充满培养基的情况下，倒掉一部分后，留10ml（25cm2皿）培养基继续放培养箱培养就可以了对吗？

答：可以，细胞没那么脆弱。拿回来直接喷酒精扔进去就可以了。

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▲问：这个769p 肾癌细胞最近几天细胞间隙有很多小黑点，是贴壁的，传代也没有用，是污染吗？跟双抗有关吗？因为有些人不加双抗养细胞，那主要还是考虑营养不够的原因吗？

答：看着很瘦，好像营养匮乏。

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▲问：请问这个细胞是污染了嘛？那请问同样培养基同一盒枪头只有一瓶污染了是怎么回事呢？那请问菌混在气溶胶中应该怎么灭菌呢？

答：这是酵母菌污染。菌的话可以通过紫外灭菌和过氧化氢熏蒸。

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▲问：上两图是不是人胚肺成纤维细胞MRC-5细胞污染了？用pbs洗洗不掉，而且越来越多，用的培养基是细胞公司那里购买的适配*培养基，才是第3次传代，越传越差，用的是不含EDTA的胰酶，之前说含EDTA的胰酶传不了几代细胞就不好了，但是不含EDTA的胰酶消化特别慢得7-8分钟，时间短了吹不下来

答：好多死细胞，长时间不换液，肯定会变黄，应该是细胞碎片，消化时间太长了，最好不超过5分钟，可以分次消化，已消化的先传皿，然后再消化还在贴壁的。

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▲问：这是什么污染吗？

答：看不太清，有点像细胞碎片

▲问：胃黏膜上皮细胞，是细胞碎片还是污染？

答：可以用三抗抢救一下。

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