细胞培养常遇问题集锦（十）

今天为大家带来细胞培养常遇问题的第十期，看看本期都为大家分享常遇的都有哪类型的问题，小编已为各位客官整理出来了~~来，上正片！

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▲问：昨天刚刚复苏的细胞，今天出现这个情况，会是什么问题呢？那是不是因为冻存的时候就污染了呢？

答：一片儿一片儿的，黑云彩一样的，是霉菌污染。也有可能。

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▲问：培养液是清亮的，高背景下看细胞也没有异常，请问这是霉菌吗？

答：这个东西很常见，有可能是血清蛋白沉淀或培养耗材里的杂质。

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▲问：以上三图霉菌污染怎么处理么呢？三抗一直在用没有效果。而且会长的越来越多。代数低的是这样。少数有，大多数没有。

答：这个细胞看起来老化得很严重呀。共用培养箱的其他人有这种污染吗？可能环境有污染，没得到*。

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▲问：上面三个图，三阴性乳腺癌细胞，细胞中间这些空泡是怎么回事呀，是细胞状态不好嘛？

答：细胞状态看着还可以，空泡有可能是杂细胞或者细胞凋亡形成的。

问：杂细胞为啥不是正常细胞（掺入的细胞）的形态呀？

答：如果是MSC，间冲干里面的亮点细胞是分裂能力强的细胞，不是分化，分化不会发亮。也有可能杂细胞或者未贴壁细胞。

问：就养两种细胞，另一种用的同种培养基。

答：还有一种可能，就是细胞有老化，老化的细胞形态会发生改变。这个细胞状态没问题，不用担心。分辨是不是老化比较简单，传代的时候一瓶密度稍大一些，另一瓶密度稍微小一些，如果是老化，密度小的那瓶异形态细胞会比较多。如果细胞有老化现象，传代的时候注意密度要稍微大一些。中间空泡可能是凋亡细胞。

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问：脐带MSC原代培养有什么技巧啊？之前分离全被污染了。

答：可用MSC无血清培养基消化法。

问：之前用的是贴壁法呢？

答：也可参考MSC无血清培养基组织块法操作。

问：整个培养皿都黏糊糊的，镜下看都是污染了，没看到细胞。

答：原代加庆大霉素预防得好些。

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