收到细胞后，发现是培养瓶，第一次操作的束手无策，怎么办？
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收到活细胞怎么办？
发布时间： 2021-12-03 点击次数： 1386次贴壁细胞请遵守以下准则：
细胞收到后，显微镜下观察，有些细胞贴壁比较牢，它不会因为运输问题有变化，收到后下显微镜下观察细胞的密度，确定无污染，细胞无异常先放培养箱稳定1-2个小时后，按照贴壁细胞消化顺序消化：
一
贴壁细胞消化顺序如下：
1.准备工作，胰酶、培养基、PBS各预热10-15分钟
1. 去上清，先用PBS清洗两次2.弃PBS后，加入1ml胰酶，前后左右轻轻摇匀后，超净台常温放置3-5分钟左右
3.显微镜下观察细胞，若细胞变得椭圆透亮后，轻拍细胞瓶壁
4.显微镜下观察细胞是否已经脱落，要是没有脱落继续消化2分钟后再轻轻拍打，95%以上细胞脱落请立即加入含有血清的培养基终止消化
5.将消化下来的细胞悬液移入离心管离心，正常离心转速：1000-1200转，5分钟
6.分瓶，第一次传代建议1：2传，或者传代一瓶，冻存一支
二
悬浮细胞传代规则：
1，收到细胞后稳定一小时后，分两个50ml的离心管对等离心1000转5分钟
2.弃上清，一管分2个T25瓶传代，一管冻存
悬浮细胞传代不需要每次都离心操作，建议每传代2次离心操作一次，以去除细胞中的碎片
三
半悬浮半贴壁细胞消化要领：
1.收到细胞稳定一小时后，悬浮细胞收集离心，贴壁细胞按照贴壁顺序来消化即可
温馨提示：
收到细胞请一定要仔细阅读说明书，按照传代步骤操作，请保持和商家一样的培养方式，比如说，牛是吃草的，你想改善它的营养，也只能把草的质量提高，千万不能换成肉啊 ，不只贵还会把牛饿死。
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