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大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
发布时间： 2021-12-04 点击次数： 999次材料与仪器
SD大鼠
PBS FBS DMEM
手术剪 手术钳 眼科剪刀 眼科镊子 大头针 手术刀 培养皿步骤
一、实验步骤
1. SD 大鼠(150-200 g)，断头，浸入75%的酒精中15 min。
2. 置入超净台中，将大鼠固定于杀鼠板上，在无菌条件下打开腹腔，分离出胸主动脉、腹主动脉， 摘出。
3. PBS 清洗3 遍，剥去外膜，用手术刀片刮去内膜，留下中膜并将其移入1 mL 的培基中、剪成1x1 mm2 大小组织块。
4. 再将PBS清洗组织块，移入25 mL 的培养瓶中，用尖嘴弯管均匀贴好组织块，放入37℃、5% CO2的培养箱倒置培养6 小时后，待组织块贴壁后，再加入2.5 mL 培养液后放回培养箱中。
5. 随后每3 天予以全量换液。
二、结果
3-5 天后可见组织块周围有细胞爬出，大约2 周后80－90%融合。- 下一篇：大鼠乳鼠成骨细胞培养实验——酶消化法
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