细胞培养常遇问题集锦（十七）

细胞培养问题集锦第十七期，小编会继续收集相关问题，每期都为大家更新5个细胞培养中遇到的问题并解答~

81、

▲问：hepg2细胞有很多小球聚集到一起，这是污染还是没有吹开的细胞？是不是念珠菌感染？出不来形态，吹不匀。

答：肝癌就是这样，很容易坨，肝癌会有一个聚集成团，一片一片的clone，也会成聚集，推荐是带丙酮酸钠的MEM。

82、

问：细胞培养中加入biotin有什么作用呢？

答：是为了促进细胞增殖。

83、

▲问：细胞转了敲低基因的病毒之后，为什么总会出现一些比细胞还要亮的，碎片样的东西，或者圆形的东西呢？

答：基因的表达包括 GFP用，都会用泊松分布Poisson distribution的形式出现， 有些细胞有多一点GFP的表达, 有些少的。圆形的细胞是因为基因蛋白表达较高 ，所以荧光蛋白表达都高。

▲问：这种很亮的碎片呢？感觉他不像是细胞的样子！

答：细胞开始细胞凋亡，可能是凋亡小体，可用DAPI。

84、

问：细胞刚复苏都是亮亮的圆点是什么原因？之前复苏长得很快。

答：是不是还没贴壁？

问：之前两天都长满贴壁了，这次也两天了只有一点细胞贴壁。

答：复苏率不高，是不是没冻好？

问：之前别人冻的，需要重新复苏吗？

答：如果培养基和血清养别的没问题，那不太可能是营养体系问题。可能是冻存环节出现问题，传代后不会有好转，看看细胞能增殖出来不，增殖不出来就需要重新复苏了。

85、

▲问：请问上面三个图里，细胞是染菌了吗？昨天给单独加了100ul过滤的bi血清。

答：从照片上看黑点的形态高倍数放大是球菌，低倍数放大它们是立体聚集在一起，疑似是葡萄球菌。平面聚集的是链球菌。

问：黑点是不会动的，用三抗可以吗，还有救吗？

答：细胞还有库存的话建议重新复苏，因为细胞感染了，去除要花多些时间。

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