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Biozellen 3D类器官培养基质胶使用方法
发布时间： 2022-02-21 点击次数： 1901次近年来，为尽可能的模仿细胞在生物体内的生长环境，得到更接近类似于体内生长的细胞, 越来越多研究人员开始关注三维细胞、类器官培养技术。
以下为大家介绍Biozellen 3D类器官培养基质胶的使用步骤：
A、试剂制备
A 基质胶：将 A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟， 确认*融解.C 缓冲溶液(1X)制备：使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如： 无血清 DMEM、opt-MEM) 制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) .D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液.B、Biozellen®3D 类器官培养基质胶的制备
全部步骤需要在无菌环境内操作，操作步骤如下：1. 将 24 孔培养板放置于冰箱或者冰上预冷。2. 细胞计数后取 2×105~2×107 细胞与 0.5ml 37℃ 培养基均匀混合，并与 0.5ml 37℃ A 胶按照 1:1 等比例均匀混合，最终细胞密度 1*105~1*107cells/mL。注：请选择适当的培养溶液与条件进行试验。3.取 20-40 微升步骤 2 含细胞的混合 A 胶溶液滴于 步骤 1 预冷的培养板上，胶体将于 5 分钟内成胶。注: 测试胶体是否成胶，可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。4.待胶体成胶后，添加 1 毫升冰的 1X C 缓冲溶液，并盖过步骤 3 的胶溶液，固定 15 分钟。5.待 15 分钟固定后，小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。6 将含有细胞的胶于 37°C 二氧化碳培养箱内进行 7~14 天的培养，并观察细胞球体的形成，按正常培养基更换频率进行更换操作。C、溶胶与收集细胞球体准备程序
小心的将培养基吸取移除，并用 1X PBS 进行清洗。小心的将 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 缓冲溶液，盖过胶滴于室温反应 5 分钟。温和的用 1 毫升移液管吸取，直到胶滴*溶解。将含有细胞球体的溶液吸入 1.5 毫升离心管，用 1000 rpm 的转速离心 10 分钟，移除上清液体并收集细胞球体做分析。D、收集单颗细胞准备程序
在分离单细胞前，先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作1. 添加 trypsin-EDTA 并与收集的细胞球体于 37°C 混合反应。2. 用 1 毫升移液管混合，直到细胞体*分解。3. 待细胞球体*分解，加入 3 倍体积的 1X PBS，并用 1000 转的转速进行离心 10 分钟，并移除上清液体收集沉淀的单细胞做分析。
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安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户，提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂；inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务；提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务，努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。
深圳市安培生物科技有限公司是美国Biozellen公司的中国代理商。Biozellen®3D培养基质胶经验证可*替代BD/康宁的基质胶，来源为植物源且氨基酸序列人源化，无人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服务和技术支持。
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