Biozellen基质胶在3D细胞球体培养实验的应用操作

Biozellen®3D细胞培养基质胶在3D细胞球体培养试验步骤：

A、试剂制备

1、A 基质胶：将 A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟， 确认*融解.

2、C 缓冲溶液(1X)制备：使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如： 无血清 DMEM、opt-MEM) 制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) .

3、D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液.

B、Biozellen®3D细胞培养基质胶的制备

全部步骤需要在无菌环境内操作，操作步骤如下：

1、将 24 孔培养板放置于冰上预冷半小时。

2、细胞计数后取 2×10^5~2×10^7 细胞与 0.5 毫升 37℃ 细胞培养基均匀混合，并与 0.5 毫升 37℃ A 胶按照 1:1 等比例均匀混合，最终细胞密度1*10^5~1*10^7cells/mL。

注：请选择适当的培养溶液与条件进行试验。

3、取 20-40 微升步骤 2 的混合液滴于 步骤 1 预冷的培养板上，胶体将于 5 分钟内成胶。 注: 测试胶体是否成胶，可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。

4、待胶体成胶后，添加 1 毫升冰的 1X C 缓冲溶液，并盖过步骤 3 的胶溶液，固定 15 分钟。

5、待 15 分钟固定后，小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。

6、将含有细胞的胶于 37°C 二氧化碳培养箱内进行 7~14 天的培养，并观察细胞球体的形成，按正常培养基更换频率进行更换操作。

C、溶胶与收集细胞球体准备程序

1、小心的将培养基吸取移除，并用 1X PBS 进行清洗。

2、小心的将 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 缓冲溶液，盖过胶滴于室温反应 5 分钟。

3、温和的用 1 毫升移液管吸取，直到胶滴*溶解。

4、将含有细胞球体的溶液吸入 1.5 毫升离心管，用 1000 rpm 的转速离心 10 分钟，移除上清液体并收集细胞球体做分析。

D、收集单颗细胞准备程序

在分离单细胞前，先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作

1、添加 trypsin-EDTA 并与收集的细胞球体于 37°C 混合反应。

2、用 1 毫升移液管混合，直到细胞体*分解。

3、待细胞球体*分解，加入 3 倍体积的 1X PBS，并用 1000 转的转速进行离心 10 分钟，并移除上清液体收集沉淀的单细胞做分析。

Biozellen®3D细胞培养基质胶编辑

Biozellen®3D 细胞培养基质胶套装

货号： B-P-00002-2、B-P-00002-4、B-P-00002-10

规格： 2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

保存条件：4℃保存、 保存两年

一、产品描述

Biozellen®3D 细胞培养基质胶套装包含整套基质胶、胶体固定液、胶体溶解液，可应用到 3D 细胞培养与微环境应用等；本试剂盒操作便利且可调控基质胶硬度进行多种细胞培养测试等；胶体可快速被固定液分解， 请操作前详细阅读此使用指南。

（Biozellen®3D 细胞培养基质胶套装为植物来源，无动物源成分、不含酚红）

二、应用

•3D 细胞球体培养

•小鼠皮下成瘤

•细胞侵袭

•适合用于 3D 细胞药物筛检平台

•细胞生长和分化

•代谢/毒理学研究

三、样本类型

•肿瘤细胞系、哺乳动物组织

四、试剂盒组分

试剂盒组分编辑

深圳市安培生物科技有限公司是美国Biozellen公司的中国代理商。Biozellen®3D细胞/类器官培养基质胶现货供应，经验证可*替代BD/康宁的基质胶，来源为植物源且氨基酸序列人源化，无人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服务和技术支持。

安培生物科技有限公司（Biozellen中国代理商）

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