引物设计原则

1）扩增产物长度 100 bp-150 bp 为佳；

2）引物长度 17 bp-25 bp 最好；

3）正向引物和反向引物的 Tm 值最好相差不要超过 1℃。Tm 值调整至 60℃-65℃为佳；

4）引物的 GC 含量控制在 40%-60%之间，最佳为 45%-55%；

5）引物 3'末端碱基最好为 G 或 C 或 A，避免使用 T；

6）避开引物内部或者两条引物之间有 3 个碱基以上的互补序列，二条引物之间的 3'端避开有 2 个碱基以上的互补序列；

7）引物 A、G、C、T 整体分布尽量要均匀，避免使用 GC 或者 TA 含量高的区域，尤其是 3'端，必须避开 GC 含量不均匀的区域；

8）最好跨内含子设计引物。

深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技术实力、壹流的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业。总部设在广东，服务面向全国。安培生物集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技公司，旨在为生命科学的发展提供壹流的产品与服务。本公司建立了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、信号传导和神经科学等领域的产品供应线，在各个领域内向用户提供世界前沿水平和质量稳定的产品，安培生物致力于为广大的科研机构、高等院校等优质客户提供优质的产品、技术支持与服务。