如何提高 RT-PCR 反应的灵敏度与特异性

1.首先确定模板 RNA 完整性好，无 DNA 污染。

2.RNA 模板中不应含有扩增反应抑制剂。

3.为了防止模板降解，在反应体系中加入 RNase 抑制剂 RNasin。

4.使用适量的模板 RNA，模板量太多会降低特异性，太少会导致扩增不出条带或条带太弱。

5.若模板中有二级结构，可通过提高逆转录反应温度来提高扩增效果。

6.设计引物时，避免在引物 3’端含有互补序列，避免形成内部发卡结构。

深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技术实力、壹流的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业。总部设在广东，服务面向全国。安培生物集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技公司，旨在为生命科学的发展提供壹流的产品与服务。本公司建立了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、信号传导和神经科学等领域的产品供应线，在各个领域内向用户提供世界前沿水平和质量稳定的产品，安培生物致力于为广大的科研机构、高等院校等优质客户提供优质的产品、技术支持与服务。