siRNA转染操作及要点

转染试剂储存

转染试剂-20°C避光保存，Trans Enhancer于2-8°C存放

体外转染操作流程

1：细胞接种:转染前一天接种细胞，使细胞在转染时密度在30-50%

2：siRNA-Starvio 转染复合物准备:Starvio 用25ulTrans Enhancer 稀释室温孵育5min将siRNA稀释液与 Starvio 稀释液混合(总体积50ul)

将转染复合物加到培养的细胞内 

注意事项

1:建议对转染条件进行优化，特别是第一次使用。例如:24孔培养板，siRNA 用量在 6、12、18、24、30 pmol之间调整；

2：Starvio 试剂用量在1.0-3.0ul之间调整；

3：转染过程尽量不要使用抗生素，否则会导致细胞死亡；

4：增加计算接种细胞的数量，使转染时细胞密度在30-50%左右。

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