细胞培养时的三个常见小问题

三个常见小问题：

细胞培养用的培养基是不是必须加双抗？血清在使用之前是不是一定要灭活？往培养基里加细胞因子又是什么操作？

要不要加双抗？

在培养基中添加抗生素是一种常见的操作，其主要作用是抑制或杀死培养物中的某些细菌或真菌，从而避免它们对目标细胞的干扰和污染。

在培养实验中，选择适当浓度和种类的抗生素，可以有效地消除或减少杂菌、污染菌或其他不需要的微生物，保证培养物的纯度和稳定性。

同时，添加抗生素还可以用来筛选或检测耐药性菌株，评估其对抗生素的敏感性和耐受性。

但是，添加抗生素并不能确保你的细胞一定不被微生物污染，因操作不当造成污染的还是会被污染的。

并且，一旦细胞被污染，抗生素也只能起到一定的抑制延缓作用，并不能全部杀灭微生物。而且，长期添加抗生素的话，还容易掩盖培养环境的真实情况。

因此 ，虽然在培养基中添加抗生素是常见操作，但并不是必须操作。

细胞因子是什么？

除了抗生素外，培养基中还可以添加细胞因子，以模拟体内环境和调节细胞功能。

细胞因子是一类多肽分子或蛋白质，由细胞自身或其他细胞产生，并通过受体介导的信号转导途径影响目标细胞的增殖、分化、存活、迁移等过程。

在细胞培养中，添加适当浓度和种类的细胞因子，可以促进细胞增殖和分化，提高细胞存活率和功能表现。

例如，添加表皮生长因子（EGF）可以促进表皮细胞增殖和修复；添加肝细胞生长因子（HGF）可以促进肝细胞增殖和再生；添加白细胞介素-2（IL-2）可以促进T淋巴细胞增殖和活化等。

此外，添加某些细胞因子还可以诱导干细胞分化为特定类型的成体细胞，如添加神经营养因子（NGF）可以诱导干细胞分化为神经元。

血清要灭活才能用？

血清中含有生长因子可促进细胞繁殖，含有附着因子可促进细胞贴壁，同时还有一种特殊的活性能抵抗胰蛋白酶的消化作用。

血清内含有丰富的矿物质、酯类和激素。最常见的血清包括：小牛血清、胎牛血清、成年马血清等。其中胎牛血清对培养要求高的细胞系。

血清来源于动物， 因此必定存在批次间的差异，且生产过程中由于工艺流程的不同，哪怕是同一类型的血清也会存在质量上的巨大差异。

血清的灭活是将血清置于56摄氏度中30分钟，然后再分装成数份保存于-20摄氏度。

血清加热的最初目的是为了免疫分析时用于灭活补体的，因此就有了血清使用前要灭活的说法。

但现在商业化的血清产品，基本上出厂之前都经过了灭活处理，所以一般情况下，就不需要再操作一次灭活了，除非供应商在销售时特别强调了要进行这个操作。

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