细胞长不好的原因与解答！

细胞长不好的原因与解答：

培养细胞不贴壁：

可能原因：

1.胰蛋白酶消化过度；

2.支原体污染；

3.培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；

4.细胞老化；

5.接种细胞起始浓度太低或太高。

解决方法

1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度；

2.分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物；

3.使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2；、

4.启用新的保种细胞；

5.调节最佳接种细胞浓度。

悬浮细胞成簇

可能原因：

1.培养液中含钙,镁离子；

2.支原体污染；

3.蛋白酶过度消化使得细胞裂解；

4.DNA污染。

解决方法：

1.用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，轻巧吹吸

2.细胞获得单细胞悬液；

3.分离培养物，检测支原体；

4.DNasel处理细胞。

培养细胞生长缓慢

可能原因：

1.由于更换不同培养液或血清；

2.培养液中一些细胞生长必须成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏；

3.培养物中有少量细菌或真菌污染；

4.试剂保存不当；

5.接种细胞起始浓度太低；

6.细胞已老化；

7.支原体污染。

解决方法：

1.比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验，让细胞逐渐适应新培养液；

2.换入新鲜配置培养液，或补加谷氨酰胺及生长因子；

3.用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物；

4.血清需保存在-10到-20℃。培养液需在2-8℃避光保存。含血清培养液在2-8℃保存，需在1周内用完；

5.增加接种细胞起始浓度；

6.换用新的保种细胞；

7.分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

培养细胞生长不好：

可能原因：

细胞本身的状态

1. 细胞传代次数多，细胞老化；

2. 细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；

3. 细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；

4. 胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未全部分离而成团，细胞死亡；

5. 细胞的冻存与复苏：慢冻速溶。

污染

1. 支原体污染；

2. 霉菌污染。

培养基或血清

1. 更换血清或培养基之前未进行验证；

2. 选择的培养基是否合适；

3. 培养基配制是否合适；

4. 培养基配制是否准确无误。

培养环境

1. CO2供应是否正常；

2. 培养箱或摇床温度控制是否正确。

解决方法

根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案

1.注意细胞的本身状态：如传代次数，接种量等；

2.避免产生污染（用正规，合法，可朔源的血清）；

3.要用合适的血清或培养基，最好经过验证；

4.注意实验室的环境。

培养细胞死亡：

可能原因：

1.培养箱内无CO2；

2.培养箱内温度波动太大；

3.细胞冻存或复苏过程中损伤；

4.培养液渗透压不正确；

5.培养液中有毒代谢产物堆积。

解决方法：
1.检测培养箱内CO2；

2.检查培养箱内温度；

3.取新的保存细胞种；

4.检测培养液渗透压；

5.换入新鲜培养液；

安培生物致力成为推动生命科学进步值得信赖的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技术实力、先进的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业。总部设在广东，服务面向全国。安培生物集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技公司，旨在为生命科学的发展提供较好的产品与服务。本公司建立了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、信号传导和神经科学等领域的产品供应线，在各个领域内向用户提供较高的水平和质量稳定的产品，安培生物致力于为广大的科研机构、高等院校等客户提供各种产品、技术支持与服务。

可以在第一时间为用户提供比较先进的专业资讯和完备的产品和物流服务。 专业的技术力量使得我们能够为广大用户提供强大的技术支持，深厚的人脉资源使得我们在全国主要城市拥有众多的合作伙伴，安培生物非常荣幸能将世界上先进的高科技产品推荐给国内从事生物学领域科研的老师和同仁。作为专业性的产品供应商，公司出资存备了大量现货，配合优秀的销售队伍以及专业的技术支持，随时为客户提供服务。