何时用瓶皿培养，何时用孔板培养

细胞的体外培养需要依附在人工附着物上，大多数脊椎动物细胞在人工附着物上会呈现为单层生长的状态。

所谓的人工附着物，就是常见的多孔板、培养瓶、培养皿。

用什么类型的附着物来培养细胞，是有什么依据的呢？这一期内容就讲讲这个话题。

基本概念

从材料分类上看，常见的细胞培养附着物分为一次性的塑料和玻璃。

先说玻璃，成本低、可重复使用，透光性好，但由于其清洗过程复杂，不易保存，现在已逐渐被一次性塑料取代了。

一次性塑料的主要成份是聚丙乙烯，由人工合成，质地均匀，产量大成本低，能为细胞提供一个良好的生长表面。

这里有一个小细节，有的塑料培养器皿会标注“已表面处理“，这是什么意思呢？

因为聚丙乙烯生产好以后，其表面是疏水性的，这不利于细胞贴壁生长，因此，需要进行特殊的工艺处理，例如射线照射、电离辐射，这样处理过的表面细胞才能更好的贴在上面生长。

选择器皿的原则

选择用多孔板培养细胞还是培养瓶培养细胞，是根据你培养细胞的目的来决定的。

如果培养细胞的目的是通过细胞倍增，最终获得大量细胞或细胞分泌物，则应该使用培养皿、培养瓶来培养细胞。

如果目的是为了进行微量的、多次的重复实验来分析细胞或细胞产物，则应该使用多孔板来培养。

确定培养目的以后，应该根据具体情况选择不同规格的器皿。以下分类说明。

1 选择培养瓶、培养皿培养细胞

首先，根据期望获得的细胞产量来选择，培养瓶是通过表面积来命名的，例如T25、T75、T175，数字就是表面积，25就是25cm²，如此类推；

培养皿是按照其直径来命名的，例如3.5cm、9cm。以下，是按照不同规格的培养器皿所能培养的细胞数量绘制的参考图，有兴趣的同学可以保存下来以后用。

其次，根据实验操作熟练程度来选择，培养皿的操作比较方便，不管是换液、传代、还是收获细胞，但因为其开口很大，所以容易污染，如果你是新手，不建议直接用培养皿养细胞。

最后，如果选择培养瓶培养，还应该尽量选择有斜肩设计、带透气孔瓶盖的型号。

前者可以避免培养瓶平放后，过多的培养基接触瓶盖造成污染，后者可以保持内外的二氧化碳浓度一致。

如果瓶盖不透气，那在放进培养箱时，应拧松一圈，以便内外气体能顺利交换。

2 选择多孔板培养细胞

首先，也是要判断你的实验需要多少细胞来进行分析，以此来选择多孔板的规格。大家同样可以参照上面的图表。

有极个别的孔板，孔底部是锥形底或圆底，这种规格的多孔板适用于非组织型的细胞培养，对于大多数贴壁生长的细胞来说不适合。

选择好合适的孔板后，在培养阶段，有2点注意事项：

A 多孔板会带板盖，但其密封性不好，在培养箱内会造成边缘的孔位蒸发效率过高，进而影响细胞生长速率。

有条件的同学，可以在盖上板盖后在缝隙处贴一圈封口膜。或者舍弃边缘孔位，并采用添加培养基来代替。

B 当细胞种入孔内以后，不应该再进行过多的震动，例如晃动、抖动培养板，而应该轻缓的放入培养箱中。

如果培养箱由多人共用，还应该考虑大家频繁开关箱门、拿放孔板造成的震动，这些不利因素都应该尽量减少。

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