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    稳定载体时,为什么载体上通常有两个抗性基因?

    发布时间: 2024-05-28  点击次数: 541次

    构建的载体上有两个抗性基因,但一般只有一个抗性用来筛细胞。两个抗性基因的本质区别是什么呢?


    我们来看看这个例子,现在这个是pcDNA3.1质粒的图谱,载体上有两个抗性基因,Amp(氨苄青霉素)和Neo(新霉素)。


    氨苄青霉素是在bla启动子驱动下表达,bla是原核表达启动子,在大肠杆菌可以表达,因此,转化后的质粒用Amp可以筛选出来。


    而新霉素是在SV40启动子驱动下表达,SV40是真核表达启动子,转入真核细胞后表达,所以只有转进了载体的细胞才能被筛选出来。


    所以,稳定转染时,载体上的两个抗性基因,一个用于构建克隆时筛选细菌,另一个用来对转染细胞的筛选。


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