提取纯化产品册---06 柱式DNA提取产品（DC202、DC203）

FastPure® EndoFree Plasmid Maxi Kit

质粒大提试剂盒 (DC202)

内毒素含量极低，后续可做转染级别实验

产量高，高拷贝质粒产量达到 0.2 mg-1.5 mg

操作简便

保存条件 : 试剂盒除 RNase A 和内毒素清除剂外，其他组分室温保存；RNase A 保存于 -30℃ ~-15℃ ;  内毒素清除剂 2℃ -8℃可以保存一个月，长期保存放 -30℃ ~-15℃ ▲ 若低温保存，溶液容易产生沉淀。在使用前务必将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在 37℃水浴锅中预热 10 min，溶解沉淀，混匀后再使用。

产品概述

本试剂盒适用于提取 150 ml-300 ml 过夜培养的菌液，采用改进的 SDS- 碱裂解法裂解细胞，粗提物通过内毒素清除剂选择性结合离心去除内毒素，然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低 pH 值状态下选择性地结合溶液中的质粒 DNA，再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去 除，最后用低盐、高 pH 值的洗脱缓冲液将纯净质粒 DNA 从硅基质膜上洗脱。离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜， 柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好，克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀， 可快速提取 0.2 mg-1.5 mg 纯净的高拷贝质粒 DNA，提取率达 80-90%。工艺配方清除内毒素，内毒素含量极低（<0.1 EU/μg DNA）， 细胞转染效果非常好。也可直接用于酶切、PCR、体外转录、转化、测序等各种分子生物学实验。

性能展示

产量高

用 FastPure®  Endofree Plasmid Maxi Kit 试剂盒提取大小为 3.0 kb、 5.0 kb、5.9 kb、21.5kb 不同大小的质粒，1% 琼脂糖胶电泳检测， M：DL15000 DNA Marker (Vazyme #MD103)。结果显示本试剂盒 针对不同大小的质粒均具有较好的提取效果，产量高。

纯度高

使 用 FastPure®  Endofree Plasmid Maxi Kit 提取的 M3K 的质粒 进行酶切验证，1% 琼脂糖胶电泳检测，M：DL5000 DNA Marker  (Vazyme #MD102)。结果显示提取的质粒纯度高，对下游酶切反 应无抑制作用。

操作流程概要

适用范围

本产品适用 150 - 300 ml 过夜培养的菌液，大规模提取质粒。

组分

RNase A：10 mg/ml，用于去除 RNA； Buffer P1：细菌悬浮液，第一次使用前请将 RNase A 加入到 Buffer P1 中； Buffer P2：细菌裂解液（含 SDS/NaOH)； Buffer P4：中和液； 内毒素清除剂：可以有效去除质粒粗提液中的内毒素； Buffer PW：洗涤液，第一次使用前请按说明加一定体积的乙醇； Buffer TB：洗脱缓冲液； FastPure DNA Maxi Columns：质粒 DNA 吸附柱； Collection Tube 50 ml：滤液收集管。

自备材料

无水乙醇，异丙醇，50ml高速离心管

△ Buffer PW 需在使用前添加一定量的无水乙醇

提取流程

FastPure® EndoFree Plasmid Mini Kit

高产无内毒，25 min 转染级质粒小提 (DC203)

产量高 提取效率高，质粒 DNA 产量高达 50 µg
内毒素残留量 内毒素残留量 ≤0.1 EU/µg，下游可做转染级别实验

快速 无需冷热交替，25 min 内即可完成提取

产品概述
本试剂盒适用于1 - 5 ml过夜培养的菌液，采用优化的碱裂解法裂解细胞，通过硅胶膜吸附技术与特殊的溶液，可特异性结合质粒并有效地去除内毒素、蛋白等杂质，整个提取过程仅需 25 min。提取的质粒 DNA 内毒素残留低 (≤0.1 EU/μg)，可用于多种细胞的转染及常规的分子实验。

性能展示（产量高）

分别使用 Vazyme #DC203( 简称 V) 与市售竞品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I)，按照各自流程提取 pUC57( 高拷贝 ) 和 M3K( 低拷贝 ) 的质 粒，对提取产物进行浓度测定 ( 图 1A、B) 及跑胶检测 ( 图 1C、D)。结果表明，Vazyme #DC203 提取的质粒产量高、完整性好。

分别使用 Vazyme #DC203( 简称 V) 与市售竞品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I)，按照各自流程提取 pUC57( 高拷贝 ) 和 M3K( 低拷贝 ) 的质粒， 对提取的产物进行内毒素残留量的测定 ( 图 2A、B)。结果表明，Vazyme #DC203 提取的质粒内毒素残留量低，且优于竞品。

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