一、产品说明
1、名称
KB016肠杆菌科鉴定试剂盒（Hi24™ Enterobacteriaceae Identification Kit）
2、规格
5KT 、10KT 、20KT
3、货号
KB016
二、概述
KB016肠杆菌科鉴定试剂盒有两个鉴定卡，共包含13种传统生化试验和11种糖发酵试验，通过微生物代谢反应导致培养基颜色变化。
三、使用说明
待鉴定菌种应*行分离和纯化。可在营养琼脂（货号：M001/M1274）或鉴别培养基如麦康凯琼脂（货号：M082）上挑取一个菌落，接种在５ml脑心浸膏肉汤中，在35-37℃培养4-6小时，直到在620nm处，接种液浊度≥0.1OD或0.5McFarland标准。一些苛养菌可能需延长孵育至6小时以上，使浊度达到0.1OD（620nm）
无菌打开试剂盒，撕掉封条。每孔接种50μl上述菌液。也可用接种环划线。在35℃±2℃孵育18-24小时。
四、结果判定
依据结果诠释表。以下试验在18-24小时孵育期结束后，添加如下试剂：
1）苯丙氨酸脱氨试验：第5孔
加2-3滴TDA试剂（货号：R036）。1分钟内出现深绿色为阳性。
无颜色变化为阴性。
2）伏普试验：第6孔
加2-3滴Barritt试剂A(货号：R029)和1滴Barritt试剂B（货号：R030）
5-10分钟内出现粉红色为阳性
无颜色变化或有轻微变化为阴性。
3）甲基红试验：第7孔
加1-2滴甲基红试剂（货号：I007）
试剂保持红色为阳性
试剂脱色变黄为阴性
4）吲哚试验：第8孔
加1-2滴Kovac试剂（货号：R008）。10秒内出现粉红色为阳性。
试剂保持浅白色为阴性。
5）PYR（吡咯烷酮酶）试验：第9孔
加1-2滴PYR试剂（货号：R043）。出现并保持樱桃红色为阳性。
出现粉色、橘黄或黄色为阴性。
24种生化反应明细
鉴定卡1
1 | ONPG试验 |
2 | 赖氨酸脱羧试验 |
3 | 鸟氨酸脱羧试验 |
4 | 尿素酶试验 |
5 | 苯丙氨酸脱氨试验 |
6 | 伏普试验 |
7 | 甲基红试验 |
8 | 吲哚试验 |
9 | 吡咯烷酮酶试验 |
10 | β-葡萄糖醛酸酶试验 |
11 | α-半乳糖苷酶试验 |
12 | β-木糖酶试验 |
鉴定卡2
13 | 七叶苷水解试验 |
14 | 蔗糖发酵试验 |
15 | 山梨醇发酵试验 |
16 | 海藻糖发酵试验 |
17 | 葡萄糖发酵试验 |
18 | 纤维二糖发酵试验 |
19 | 蜜二糖发酵试验 |
20 | 水杨苷发酵试验 |
21 | 甘露糖发酵试验 |
22 | 麦芽糖发酵试验 |
23 | 棉子糖发酵试验 |
24 | 乳糖发酵试验 |
鉴定的肠杆菌科成员
无丙二酸柠檬酸杆菌（Citrobacter amalonaticus）
布氏柠檬酸杆菌（Citrobacter braakii）
法氏柠檬酸杆菌（Citrobacter farmeri）
弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii）
柯氏柠檬酸杆菌（Citrobacter koseri）
塞氏柠檬酸杆菌（Citrobacter sedlakii）
魏氏柠檬酸杆菌（Citrobacter werkmanii）
杨氏柠檬酸杆菌（Citrobacter youngae）
保科爱德华菌（Edwardsiella hoshinae）
迟钝爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）
产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes）
河生肠杆菌（Enterobacter amnigenus）
生癌肠杆菌（Enterobacter cancerogenus）
阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）
日沟维肠杆菌（Enterobacter gergoviae）
阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）
螳螂埃希氏菌（Escherichia blattae）
大肠埃希氏菌（Escherichia coli）
侵袭性大肠埃希氏菌（Escherichia coli invasive）
弗格森埃希氏菌（Escherichia fergusonii）
赫尔曼埃希氏菌（Escherichia hermannii）
伤口埃希菌（Escherichia vulneris）
蜂房哈夫尼菌（Hafnia alvei）
产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）
臭鼻克雷伯菌（Klebsiella ozaenae）
肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）
鼻硬结克雷伯氏菌（Klebsiella rhinoscleromatis）
抗坏血酸克吕沃尔菌（Kluyvera ascorbata）
非脱羧勒克菌（Leclercia adecarboxylata）
摩氏摩根菌摩氏亚种（Morganella morganii ssp. morganii）
摩氏摩根菌塞氏亚种（Morganella morganii ssp. sibonii）
成团泛菌（Pantoea agglomerans）
分散泛菌（Pantoea dispersa）
鸡（吧）巴斯德氏菌（Pasteurella gallinarum）
多杀巴斯德氏菌（Pasteurella multocida）
奇异变形杆菌（Proteus mirabilis）
潘尼变形杆菌（Proteus penneri）
普通变形杆菌（Proteus vulgaris）
产碱普罗维登斯菌（Providencia alcalifaciens）
雷极普罗维登斯菌（Providencia rettgeri）
拉氏普罗维登斯菌（Providencia rustigianni）
斯氏普罗维登斯菌（Providencia stuartii）
水生拉恩菌（Rahnella aquatilis）
亚利桑那沙门氏菌（Salmonella arizona）
猪霍乱沙门氏菌（Salmonella choleraesuis）
甲型副伤寒沙门氏菌（Salmonella paratyphi）
沙门氏菌属（Salmonella spp. ）
伤寒沙门氏菌（Salmonella typhi）
虫媒沙雷菌（Serratia entomophila）
无花果沙雷菌（Serratia ficaria）
居泉沙雷菌（Serratia fonticola）
粘质沙雷菌（Serratia marcescens）
气味沙雷菌1型（Serratia odorifera 1）
气味沙雷菌2型（Serratia odorifera 2）
普城沙雷菌（Serratia plymuthica）
深红沙雷菌（Serratia rubidaea）
痢疾志贺氏菌-A群（Shigella dysenteriae_serogroup_A）
福氏志贺菌-B群（Shigella flexneri_serogroup_B）
宋内氏志贺菌（Shigella sonnei）
志贺氏菌属（不含宋内氏志贺菌）（Shigella spp. (not sonnei) ）
小肠结肠炎耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica）
克氏耶尔森氏菌（Yersinia kristensenii）
假结核耶尔森氏菌（Yersinia pseudotuberculosis）
罗氏耶尔森氏菌（Yersinia rohdei）
雷金斯堡约克氏菌（Yokenella regensburgei）
储存条件及保质期
2℃-8℃；12个月
