一、小鼠睾丸间充质细胞转染试剂简介:
随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。
理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。而Zeta Life多肽小分子转染试剂采用新型分子材料,其尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;通过细胞主动吞噬吸收进入细胞;进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力;不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据;可转染免疫细胞、悬浮细胞等。
二、使用说明:
1、材料准备
RNA 浓度 20 uM /L
质粒 DNA 浓度 300 ng-2 ug/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素 )
2、操作步骤
提前 1 天接种细胞:细胞汇合度在 60-80%左右,再进行转染。
核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照 1:1 关系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混匀,室温静 止 10-15 分钟。
在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基 里面可以含有血清。
细胞换液:转染 24 小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。
分析结果:质粒 DNA 转染 48-72 小时后荧光检测转染效率,48-96 小时检测 mRNA 或蛋白表达。若 进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后 24-48 小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA 转染后 9 小时荧光检测转染效率,48-72 小时检测 mRNA 或蛋白表达。
三、产品说明:
1、产品名称
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包装规格
货号:AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150
规格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml
3、储存条件
常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融。
四、小鼠睾丸间充质细胞转染试剂转染效果