THP-1细胞高效转染试剂
一、转染条件
转染细胞密度:电讯
培养板:24孔板
转染试剂用量:电讯
质粒DNA用量:电讯
转染试剂:AD600150,Zeta Life Advanced DNA RNA转染试剂
转染时间:48小时
血清:Z7180FBS-500超低内毒素胎牛血清
细胞冻存:CE70100T无血清细胞冻存液
细胞活检测:K009-500,CCK8
二、THP-1细胞高效转染试剂操作步骤
提前 1 天接种细胞:细胞汇合度在 60-80%左右,再进行转染。
核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照 1:1 关系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混匀,室温静 止 10-15 分钟。
在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基 里面可以含有血清。
细胞换液:转染 24 小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。
分析结果:质粒 DNA 转染 48-72 小时后荧光检测转染效率,48-96 小时检测 mRNA 或蛋白表达。若 进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后 24-48 小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA 转染后 9 小时荧光检测转染效率,48-72 小时检测 mRNA 或蛋白表达。
三、产品说明:
1、产品名称
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包装规格
货号:AD600075
规格:0.75ml
3、储存条件
常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融。
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