in vivo Advanced转染试剂
描述
in vivo Advanced转染试剂可以通过静脉注射或体内局部组织注射的方式完成转染过程。此外，转染过程中总注射体积较小，致密组织可通过显微注射来完成转染，且转染复合物在体内循环时间较长。DNA，siRNA及共转染均可用此款转染试剂来完成转染操作。
基本条件
DNA
浓度: 300 ng/ul - 2 μg/ul;
溶剂: 质粒DNA需溶于双蒸水或超纯水;
内毒素: 去内毒素
RNA
浓度: 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM
活体动物体内转染操作步骤
转染复合物制备: 核酸和转染试剂直接按照1:1混合。之后用移液器吹打混合溶液10-15次以充分混匀。将混合溶液于室温环境中静置10-15分钟，转染复合物即可制备结束。在复合物制备过程中，离心管的管壁要确保没有液体残留。
用注射器或显微注射针完成静脉注射或局部组织注射操作。
注射后3-5天，转染效率可达到峰值，靶基因的表达量可于此时进行检测。
活体动物体内转染注射用量
动物 | 注射方式 | 最大注射量(ul) | DNA用量(ug) | siRNA用量(ul) | 转染试剂用量(ul) |
新生小鼠 | 脑室内注射 | 2 | 1 | 1 | 1 |
裸鼠 | 尾静脉注射 | 400 | 62 | 62 | 62 |
肿瘤内注射 | 50 | 17 | 17 | 17 | |
成年小鼠 | 尾静脉注射 | 400 | 62 | 62 | 62 |
腹腔内注射 | 800 | 100 | 100 | 100 | |
脑室内注射 | 5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | |
肿瘤内注射 | 50 | 17 | 17 | 17 | |
成年大鼠 | 尾静脉注射 | 2000 | 505 | 505 | 505 |
脑室内注射 | 25 | 15 | 15 | 15 |
注意事项
DNA (μg) 或20 μM siRNA (μl)与转染试剂的比例为1:1。
上表中siRNA的注射体积是针对20 μM siRNA的。如果siRNA的浓度为40 μM，则注射体积需减半；如果siRNA的浓度为80 μM，则注射体积需为表中体积的1/4；以此类推。
进行局部组织注射实验时，转染复合物的用量为5-10 μl/cm2。
进行共转染实验时，核酸总用量应和上表中用量一致，各种核酸用量的比例应根据实验目的进行调整。之后将各种核酸与转染试剂进行充分混合。
在具体实验操作过程中，核酸和转染试剂的用量可根据上表中最大注射用量进行适当调整。
订货信息
品名 | 货号 | 规格 |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500025 | 0.25 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500050 | 0.50 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500075 | 0.75 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500150 | 1.50 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500500 | 5.00 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV501000 | 10.00 ml |
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