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Biozellen类器官3D培养基质胶套装
Biozellen®基质胶特点
1、100%植物源材料,无任何动物成分;
2、胺基酸序列100%人源化 ;
3、可调控基质胶硬度进行多种细胞培养;
4、3D细胞/类器官培养种类数量范围更广;
5、无人畜共通病原菌或毒素风险;
6、较为适用于医疗级生物原料;
7、高活性、高纯度、可融化;
8、3D培养结束后基质胶可以温和融化,并保留3D细胞/类器官结构完整性。
Biozellen类器官3D培养基质胶套装
Catalog No. B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10
Specification 2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit
Storage -20℃运输, 1 年保存
一、产品描述
Biozellen®3D 类器官培养基质胶套装包含全套胶体试剂与溶解试剂,可进行 3D 类器官培养与微环境等相 关实验应用; 本试剂盒操作便利且可调控胶体硬度进行多种类器官培养测试;高分子胶体可快速形成水凝 胶, 建议操作此培养胶体前详读此使用指南。 (Biozellen®3D 类器官培养基质胶材料为植物来源,无动物成分)
二、应用
• 3D 类器官培养。
• 适合用于 3D 类器官药物筛检平台
三、适用细胞种类
• 原代细胞
• 干细胞
四、试剂盒组分
五、使用步骤:
A.试剂制备
A 基质胶:将 A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟, 确认*融解. C 缓冲溶液(1X)制备:使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如: 无血清 DMEM、opt-MEM) 制 备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) . D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液.
B.Biozellen®3D 类器官培养基质胶的制备
全部步骤需要在无菌环境内操作,操作步骤如下:
1. 将 24 孔培养板放置于冰上预冷。
2. 细胞计数后取 2×105~2×107 细胞与 0.5 毫升 37℃ 培养基均匀混合,并与 0.5 毫升 37℃ A 胶按照 1:1 等比例均匀混合,最终细胞密度 105~107cells/mL。 注:请选择适当的培养溶液与条件进行试验,贴壁细胞应在~80% 汇合度下培养。
3.取 20-40 微升步骤 2 含细胞的混合 A 胶溶液滴于 步骤 1 预冷的培养板上,胶体将于 5 分钟内成胶。 注: 测试胶体是否成胶,可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。
4.待胶体成胶后,添加 1 毫升冰的 1X C 缓冲溶液,并盖过步骤 3 的胶溶液,固定 15 分钟。
5.待 15 分钟固定后,小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。
6 将含有细胞的胶于 37°C 二氧化碳培养箱内进行 7~14 天的培养,并观察细胞球体的形成,按正常培养基 更换频率进行更换操作。
C.溶胶与收集细胞球体准备程序
小心的将培养基吸取移除,并用 1X PBS 进行清洗。 小心的将 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的 D 缓冲溶液,盖过胶滴于室温反应 5 分钟。 温和的用 1 毫升移液管吸取,直到胶滴*溶解。 将含有细胞球体的溶液吸入 1.5 毫升离心管,用 1000 rpm 的转速离心 10 分钟,移除上清液体并收集细胞 球体做分析。
D.收集单颗细胞准备程序
在分离单细胞前,先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作
1. 添加 trypsin-EDTA 并与收集的细胞球体于 37°C 混合反应。
2. 用 1 毫升移液管混合,直到细胞体*分解。
3. 待细胞球体*分解,加入 3 倍体积的 1X PBS,并用 1000 转的转速进行离心 10 分钟,并移除上清 液体收集沉淀的单细胞做分析。
六、案例分享
A.形成 3D 肿瘤球体成功案例分享
B.Biozellen 基质胶被溶解后分离的完整 3D 细胞结构照片
培养后的 3D 细胞球体, 在 Biozellen 基质胶被试剂盒里面的 D Buffer 溶解分离后仍然可以得到完整的 3D 细胞结构
仅供研究使用
深圳市安培生物科技有限公司是美国Biozellen公司的中国代理商。Biozellen®3D培养基质胶大量现货,经验证可*替代BD/康宁的基质胶,来源为植物源且氨基酸序列100%人源化,无人畜共患病的病原菌或毒素污染,提供完整售后服务和技术支持。尊敬的客户您如在订购过程中遇到任何问题都可以与我司客户经理联系寻求帮助。