细胞侵袭实验3D基质胶

细胞侵袭实验3D基质胶

应用：

•3D 细胞球体培养 

•小鼠皮下成瘤 

•细胞侵袭 

•适合用于 3D 细胞药物筛检平台 

•细胞生长和分化 

•代谢/毒理学研究

样本类型： 

•肿瘤细胞系、哺乳动物组织

试剂盒组分

细胞侵袭实验准备程序 

A、试剂准备: 

1、C 缓冲溶液 (0.5 X) 制备 : 使用 37 ℃水浴回温的无血清细胞培养液 (例如: 无血清 DMEM 等，用于 稀释 A 胶) 稀释 C 缓冲溶液 (10 X) (货号: B-P-00002-C)至 C 缓冲溶液 (0.5 X), 即体积稀释 20 倍。使 用前放置 37 度水浴槽。 (例如:1 mL C 缓冲溶液 (10 X) + 19 ml 无血清 DMEM; 如未使用完毕，可保存 于 4 ℃ 冰箱, 保存一周) 

2、A 胶 (1X) 制备 : 将 A 胶 (2X) (货号: B-P-00002-A) 置于 37 ℃水浴槽回温 10 分钟，确认*溶解。 再将 37 ℃水浴回温的无血清细胞培养液取 0.5 mL，加至 37 ℃已溶解的 0.5 mL A 胶 (2X)，配置成 1 mL 的 A 胶 (1X)。使用前置于 37 度，可降低 A 胶黏度。(单次使用，勿重复冷冻解冻 A 胶 (1X) ) 

B、细胞侵袭实验步骤 

1、准备适用 24 孔板的 Transwell 装置(例如:康宁 Transwell insert, 8 μm PET membrane)。 

2、用 37 ℃已回温的 C 缓冲溶液 (0.5 X)将 A 胶 (1X) 原液体积稀释 5-20 倍，建议一开始可选用 15 倍。 (根据细胞种类做稀释比例对比实验，找出最为适合自己实验体系的稀释倍数，稀释倍数越高，胶体越软，越 容易穿透) 

3、根据 Transwell 上室底部面积加入步骤 2 的 0.1 mL 稀释后的 A 胶稀释液到 Transwell 上室中。 

4、将步骤 4 在 4 ℃ 冰箱孵育 2-3 小时。 

5、在 Transwell 上室中加入 0.1 mL 无血清的细胞悬液，使细胞最终浓度约 7.5 x 104 cells/well.。 

6、在 Transwell 下室中加入 0.8 mL 含 10 %血清的细胞培养液做为 chemoattractant，吸引细胞进行迁 移及分泌基质蛋白酶 (MMP) 侵袭。 (对照组为 Transwell 下室中加入含 0.8ml 无血清的细胞培养液)。 

7、将细胞培养板在 37 ℃, 5 % CO2 培养箱孵育 24-48 小时。 

8、移除培养液，以 PBS 清洗 2 次。 

9、用棉签轻轻擦掉上层未迁移的细胞。 

10、加入 1 ml 100 % 甲醇室温固定 30 分钟,再以 PBS 清洗 2 次。 

11、加入 1 ml 0.1 % 结晶紫染液 ( 0.1 % (g/ml) PBS 结晶紫) 室温染色 20 分钟，再以 PBS 清洗 2 次。 

12、将 Transwell 移至载玻片上，在显微镜下随机 6-9 个视野观察计算迁移的细胞数。

细胞侵袭实验3D基质胶特点：

1、100%植物源材料，无任何动物成分；

2、氨基酸序列100%人源化 ；

3、可调控基质胶硬度进行多种细胞培养；

4、3D培养结束后基质胶可以温和融化，并保留3D细胞/类器官结构完整性；

5、3D细胞/类器官培养种类数量范围更广

6、无人畜共通病原菌或毒素风险；

7、最为适用于医疗级生物原料；

8、高活性、高纯度、可融化；

9、4度运输、4度保存；

10、2年保存时间。

B-P-00002系列基质胶可替代corning基质胶货号：356234、356235、356237、356230、356231、354248、354263

深圳市安培生物科技有限公司是美国Biozellen公司的中国代理商。Biozellen®3D细胞培养基质胶现货供应，经验证可*替代BD/康宁的基质胶，来源为植物源且氨基酸序列100%人源化，无人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服务和技术支持。尊敬的客户您如在订购过程中遇到任何问题都可以与我司客户经理联系寻求帮助。