快速鼠尾鉴别试剂盒（PCR系列）

快速鼠尾鉴别试剂盒（PCR系列）

产品介绍

1. 产品描述：

信励致和®快速鼠尾鉴别试剂盒配备了整套的DNA粗提取及PCR扩增体系，可直接快速地对小鼠组织（如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等）样本进行PCR扩增，无需匀浆、破碎、过夜消化、酚氯仿抽提、DNA沉淀或柱式纯化等操作，操作更加简单快速。本试剂盒适用于10 kb以内目的片段扩增及4对引物以内的多重PCR反应，可用于快速基因型鉴定、小鼠基因分型等。

2. 产品特点：

（1）使用方便，试剂盒中提供的PCR扩增体系含有染料，扩增后可直接用于电泳检测。

（2）兼容性好，试剂盒兼容4对引物以内的多重PCR反应，大大加快实验进程。

快速鼠尾鉴别试剂盒（PCR系列）

使用说明

1. 产品组分：

2. 储运条件：

2×鼠尾直扩PCR预混液（含染料）于-25~-15℃保存，其余组分2~8℃保存。干冰运输。

3. 注意事项：

（1）使用组织裂解液时，需将组织全部浸没至裂解液中以保证最佳的消化效果。

（2）PCR预混液避免反复冻融。

相关数据

1. 裂解后直扩测试：

使用本品对样本进行裂解和PCR扩增检测，实验设置三组平行，结果如上图所示，扩增条带清晰、明亮、单一，实验数据有力地证明了本品中的组织裂解液对下游实验无不良影响，且2×鼠尾直扩PCR预混液特异性好。

2. 多重PCR直扩测试：

使用本品对样本进行多重PCR扩增检测，实验设置三组平行，结果如上图所示，扩增条带清晰、明亮、无杂带，实验数据有力地证明了本品中的组织裂解液对下游实验无不良影响，且2×鼠尾直扩PCR预混液扩增效率高，特异性好，兼容性广。

常见问题

1. 扩增产量低或者无法扩增？

原因分析：出现产物量低或者扩增无条带一般有以下原因：PCR 反应中加入的裂解液过量；裂解液中混入了PCR抑制物；模板加入量不适合；PCR 循环数不够；循环反应退火温度设置太高；PCR 引物错配严重。

解决方案：减少裂解液用量；或将裂解产物稀释10倍后再进行PCR扩增；或增大PCR反应体系；裂解产物用量不应超过PCR反应总体积的1/10；增加PCR循环数以获得更好的扩增效果；降低退火温度（每次降低3℃）；重新设计引物并在BLAST检测引物的特异性。

2. 非特异性扩增？

原因分析：PCR退火温度太低；循环数太多；或引物浓度/模板浓度太高；未在冰上配制PCR反应体系；或配制完成后放置时间太久；PCR引物错配。

解决方案：升高PCR退火温度；减少PCR循环数；降低引物浓度或模板浓度；重新设计PCR引物。