多片段无缝克隆试剂盒（克隆突变）
1. 产品描述：
信励致和®多片段无缝克隆试剂盒基于DNA序列同源性进行片段重组，可快速将单个或多个片段定向克隆到任意线性化载体中。本试剂盒含有的2×多片段无缝克隆混合液可将载体和片段的同源区域从双链的3' 端进行重组连接，最终得到的无缺口闭环质粒可直接转化，完成定向克隆。该试剂盒克服了酶切位点的限制，仅需在插入片段PCR引物5' 端引入线性化载体的末端序列，使得插入片段5' 端和3' 端带有线性化载体两端一致的序列（15~25 bp），即可实现插入片段的定向重组。重组反应可在恒温条件下快速进行（50 ℃处理15 min），配合灵活的PCR 产物处理方式和快速转化方法，数小时内即可完成从DNA样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。
2. 产品特点：
（1）无需考虑酶切位点，基于序列同源性反应15 min即可实现载体与片段的快速重组。
（2）插入片段的PCR产物正确且单一，无需纯化，可直接与载体进行重组反应。
（3）可以选择性进行 5 min 快速转化 E.coli 感受态细胞。
（4）可轻松实现 1~5个片段同时定向构建进入载体。
多片段无缝克隆试剂盒（克隆突变）
使用说明
1. 产品组分：
组分/含量 | AB0143 | AB0144 |
2×多片段无缝克隆混合液 | 250 μL | 500 μL |
平末端对照混合片段 | 5 μL | 5 μL |
pUC19线性化载体（50 ng/uL） | 5 μL | 5 μL |
2. 储运条件：
-25~-15℃存储，有效期12个月， 干冰运输。
3. 注意事项：
（1）片段扩增用模板、引物、线性化载体、高保真聚合酶、感受态细胞、ddH2O需要自备。
（2）重组产物冰上冷却后，可直接转化，转化时重组产物转化体积最多不应超过所用感受态细胞体积的1/10。
（3）纯化或回收的载体或目的片段品质较差会显著降低克隆阳性率。
（4）菌落少时，建议转化时适当增加重组产物的量，或者增加菌液涂布量。
（5）随着重组质粒长度的增加，克隆效率降低，建议增加引物重叠序列长度或适当延长反应时间。
